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抗豚鼠補體熒光抗體



錄入時間:2022-6-21 16:07:46 來源:現代微生物培養基和試劑手冊

【原理】

  哺乳類動物的補體可以和家兔、羊、人等哺乳類的抗體與抗原的復合物結合,因此,以熒光素標記補體的抗體,就可間接指示抗原抗體反應,這種方法也相應地稱為抗補體熒光抗體染色法,其優點是以一種抗補體熒光抗體可以檢測所有哺乳類的抗體抗原反應系統。


【制法】

  (1)從豚鼠血漿中提取補體。由于補體是由18種蛋白質組成的復雜系統,其中以補體3(C3)的含量最高,達1500μg/ml,幾乎占全部補體成分的一半,又由于C3是抗原抗體復合物激活的效應物并且有良好的耐熱性,一般常提取C3 (B1球蛋白)作為免疫原。

  (2)以C3作免疫原免疫家兔或山羊,制備抗補體抗血清。

  (3)從上述抗血清中提取免疫球蛋白G(IgG)。

  (4)以熒光素標記上述IgG,分離純化鑒定。)


【用途】

  在微生物學中主要用來檢測病毒。


【注意事項】

  (1)補體最好從豚鼠中提取,因豚鼠血清中補體含量較高。

  (2)試驗時補體可和已知抗體按一定比例混合與待測微生物或其抗原成分反應,反應完成后以水清洗去除未反應的抗體和補體,然后再加抗補體熒光抗體。

 

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